|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | E0352 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 皮膚黑色素瘤；腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 1×106 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：SK-MEL-5細(xì)胞
中文名稱：人皮膚細(xì)胞
規(guī)格：1×106
種屬：人
來源：皮膚；腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移
培養(yǎng)基：DMEM
狀態(tài)：貼壁
單位:T25/瓶
貨號(hào)：E0352
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
SK-MEL-5細(xì)胞 | 1×106 | E0352 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：
小鼠病毒表面抗體 英文名稱： Mouse Hepatitis B surface Aibody 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： HBsAb Ethyl β-D-apiofuranoside 1932405-61-2 中文名： 分子式：C7H14O5
小鼠表面抗原elisa試劑盒 小鼠表面抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠表面抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠表面抗原試劑盒、小鼠表面抗原elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 N4-Benzoylcytosine 中文名：N4-苯甲酰基胞嘧啶 分子式：C11H9N3O2 度：98.0%
小鼠表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒 N4-Benzoylcytidine 中文名：N4-苯甲酰胞苷 分子式：C16H17N3O6 度：98.0%
小鼠表面抗體(HBsAb)ELISAKit N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 4836-13-9 中文名：N4-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式：C16H17N3O5 度：98.0%
小鼠e抗原elisa試劑盒 小鼠e抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠e抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠e抗原試劑盒、小鼠e抗原elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 N4-Benzoylcytosine 中文名：N4-苯甲酰基胞嘧啶 分子式：C11H9N3O2
銀椴苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit
銀杏酚酸 HPLC≥98% 20mg 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 96T/48T
銀杏內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg 犬催乳素(PRL/LTH)試劑盒 Canine Prolactin/Leoopic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
銀杏內(nèi)酯B HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanDPDELISAKit人脫氧吩(DPD)規(guī)格：96T/48T
銀杏內(nèi)酯C HPLC≥98% 20mg 大量真菌/酵母細(xì)胞基因組DNA化試劑盒10
銀杏內(nèi)酯J HPLC≥98% 20mg Ratisletcellaibody,ICAELISA試劑盒大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
銀杏雙黃酮 HPLC≥98% 10mg 小鼠受體底物2(IRS2)ELISA試劑盒 ，英文名： IRS2 ELISA Kit
吲哚醇 HPLC≥98% 20mg 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 96T/48T
隱丹參酮 HPLC≥98% 20mg 犬促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒 Canine adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
隱綠原酸 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanDHEA-S-7ELISAKit人脫氫表雄同-S-7(DHEA-S-7)規(guī)格：96T/48T
人細(xì)胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-O-去甲基奧美拉唑硫化物5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA奧美拉唑 Omeprazole質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP33,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105)奧美拉唑 （標(biāo)準(zhǔn)品）Omeprazole質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠肝細(xì)胞;IAR20氯唑沙宗Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯唑沙宗（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SK-MEL-5細(xì)胞人星形膠質(zhì)細(xì)胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體:1%HCIVanadium standard
CM-H073人膀胱成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlYtterbium standard
TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Decitabine
人真皮成纖維母細(xì)胞-新生HDF-n地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Decitabine
RWPE-1細(xì)胞，人正常上皮細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,SH3細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細(xì)胞)FM-25-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號(hào)A3656 5-Aza-2′-deoxycytidine
注意事項(xiàng)：
SK-MEL-5細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
