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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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質粒pEGFP-N1
起訂量 (盒)價格
1-104899 /盒
≥102899 /盒
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P64465
  • 發布日期: 2020-10-28
  • 更新日期: 2025-11-05
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P64465
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 2μg
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產品名稱

規格

貨號

質粒pEGFP-N1

2μg

BK-P64465

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

伊紅染液   Gram stain  4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  中文名:  分子式:C7H9Cl2N3S  度:98.0%

伊紅Y   25g  Prednisone 21-acetate  125-10-0  中文名:醋酸潑尼松  分子式:C23H28O6  度:98.0%  關鍵詞: 

氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒   氧化型谷胱甘肽試劑盒   規格型號:96T/48T   氧化型谷胱甘肽試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:氧化型谷胱甘肽試劑盒、氧化型谷胱甘肽Eeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     α-Spinasterol  481-18-5  中文名:α-菠甾醇  分子式:C29H48O 

氧化酶(XOD)測試盒(比色法)  Pitavastatin calcium  中文名:匹伐他汀鈣  分子式:C50H46CaF2N2O8  度:98.0%

氧化酶(XOD)測試盒   紫外分光光度法   50/48  Pirfenidone  中文名:哌非尼酮  分子式:C12H11NO  度:98.0%
腦微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)檸檬酸三鉀一水Potassium  tribasic, monohydrate質量規格:>99%,BR

Raji細胞,Butt`s瘤細胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細胞 腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCLL-焦谷氨酸;氧脯氨酸H-Pyr-OH質量規格:>98%,BR

NCI-H23(非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-L-焦谷氨酸Z-Pyr-OH質量規格:>98%,BR

CCD-1095Sk(浸潤性導管癌旁皮膚細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網織細胞性瘤株;L615DL-m-酪氨酸DL-m-Tyrosine質量規格:0.98

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)肌氨酸甲酯鹽酸鹽H-Sar-OMe·HCl質量規格:BR,98%
腸動脈內皮細胞完全培養基 100mL石蠟油Paraffin oil, light fraction質量規格:分子生物學級,PCR Grade

APP-PS1細胞,APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293) 宋內氏志賀氏菌(Sh.sonnei) 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1乙酸鉀Potassium acetate質量規格:>99%,分子生物學級

CXCL10 Protein Human 重組 CXCL10 / Crg-2 蛋白無水乙酸鈉 acetate, anhydrate質量規格:>99%,分子生物學級

OS-RC-2(細胞) 5×106cells/瓶×2  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細胞裂解液 (陽性對照) 低熔點瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖Agarose, low gelling temperature質量規格:BR;具有低凝膠溫度

小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3無水1酸二氫鉀Potassium phosphate, monobasic, anhydrous質量規格:>99%,分子生物學級
Artesunate  中文名:青蒿琥酯  分子式:C19H28O8    谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測定試劑盒(比色法)                 

Aripiprazole  中文名:阿立哌唑  分子式:C23H27Cl2N3O2    總谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)含量測定試劑盒   可見分光光度法   50/48

Arillatose B  中文名:  分子式:C22H30O14    谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒   DTNB   50/48

Arctinol B  中文名:  分子式:C13H12O2S2    谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒   GR   50/48

Arbidol   中文名:鹽酸阿比朵爾  分子式:C22H26BrClN2O3S    硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)試劑盒   紫外分光光度法   50/48

質粒pEGFP-N1本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

聯系方式
手機:13564080845
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