|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P63995 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
|
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
|
出血性大腸桿菌O157:H7(EHEC O157)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63995 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠氧化抗體elisa試劑盒 小鼠氧化抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠氧化抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠氧化抗體試劑盒、小鼠氧化抗體elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide 42137-88-2 中文名：N,N-雙(2-氯乙基)對(duì)甲苯磺酰胺 分子式：C11H15Cl2NO2S 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠氧化抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide 161596-47-0 中文名： 分子式：C11H9NO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠氧化(OxLDL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide 161596-47-0 中文名： 分子式：C11H9NO3
小鼠氧化(mouse OxLDL) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benserazide 中文名：鹽酸芐絲肼 分子式：C10H16ClN3O5 度：98.0%
小鼠氧化 英文名稱：
Mouse oxidized Low Density Lipoprotein 規(guī)格：
48T/96T 英文縮寫： oxLDL Fluorocytosine 2022-85-7 中文名： 分子式：C4H4FN3O 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
WI-38細(xì)胞，二倍體細(xì)胞系 EBV陽性B瘤細(xì)胞,P3HR1細(xì)胞 615小鼠樹突狀細(xì)胞瘤株;DCS2-十八1酸單甘油酯2-Oleoylglycerol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Bcap-37(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-月桂酰-3-氯1-Lauroyl-3-chloropropanediol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CTSL1 Others Human CTSL1 / Cathepsin-L1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))4-Butylbenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)
急性T細(xì)胞細(xì)胞;TALL-1044-芐氧基苯(>98.0%(GC))4-Benzyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
RET Others Human RET Kinase 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-癸氧基苯(>97.0%(GC))4-Decyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2四丙基氫氧化銨25%溶液Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution質(zhì)量規(guī)格：BR
Caki-1, 腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞毒胡蘿卜素(>95% (HPLC),BC)Thapsigargin, from Thapsia garganica質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC
細(xì)胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫黃素 T(>75%,BS)Thioflavin T質(zhì)量規(guī)格：>75%,BS
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml硫藤黃素(>95%,BC)Thiolutin from Streptomyces luteosporeus質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC
GP140 Others HIV 類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硫堇(>90%,BS)Thionin質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS
2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名：N-乙酰氨基葡萄糖 分子式：C8H15NO6 緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱： Angiotensin Conveing
Enzyme 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫：
ACE
22-Dehydroclerosteryl acetate 中文名： 分子式：C31H48O2 膜聯(lián)蛋白2 英文名稱： Annexin 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ANXA-2
22-Dehydroclerosterol glucoside 中文名： 分子式：C35H56O6 骨堿性0酸酶 英文名稱： bone alkaline phosphatase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： BALP
22-Dehydroclerosterol 中文名：22-去氫赤桐甾醇 分子式：C29H46O 凋亡因子BAX 英文名稱： apoptogen BAX 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： BAX
21-Deoxyneridienone B 中文名： 分子式：C21H28O3 緊張素I(素、AngI) 96T/48T
出血性大腸桿菌O157:H7(EHEC O157)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
