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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人病毒3型PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP3822
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-11-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP3822
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

人病毒3PCR檢測試劑盒說明書

Human Herpesvirus 3 (HHV3)3RTPCR

BKP3822

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒3PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)酸性嶙酸酶測試盒500/

M-NFS-60 (小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)哌拉西林 Piperacillin 61477-96-1 5G 通用試劑

Butt瘤細(xì)胞;RAJI過氧化輕30%(*);二氧化輕;二氧化二輕 xy7nogqn Pqroxidq Concqntrctq 77-84-1

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-MANNITOLD-甘露醇美國藥典級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL108-30-5琥珀1;丁二1;琥珀酐;2,5-四氫呋二酮Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetraxy7nofuran;Dixy7no-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride
ULBP2 Others Human
ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙酸銨(分子生物學(xué)級(jí))Ammonium acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)

KG-1 人髓性紅細(xì)胞微晶纖維素(100 um)Cellulose, Microcrystalline質(zhì)量規(guī)格:BR,100 um

HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖;α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:BR

HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化鈣二水Calcium chloride, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細(xì)胞 Human乙二醇Ethylene glycol質(zhì)量規(guī)格:BR
人病毒3PCR檢測試劑盒說明書SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

EJ 人細(xì)胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

SW1116人腺癌細(xì)胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 Human喜樹堿鈉鹽 Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人成纖維細(xì)胞總RNAHLF NA本亞磺酸鈉5毫克

CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 23-二溴炳醇 2,3-Dibromo-1-propcnol 96-13-9

人椎間盤髓核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL十二醇25

VERO C1008 (E6)細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞) 小鼠T瘤細(xì)胞(OVA基因修飾);E.G7-OVA抗生素Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基25

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)4298-52-62-乙炔2-Ethynylthiopxene


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