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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4454 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
剛地弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Toxophasma gondiiPCR | BKP4454 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：剛地弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
Araliadiol 中文名： 分子式：C15H20O2 總基酸（T－AA）測(cè)試盒 The total amino acid (TAA) test kit
Antipyrine 中文名：安替比林 分子式：C11H12N2O 羥脯酸測(cè)試前處理試劑 Preeatme reage hydroxyproline test
Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名：蒽醌-2-羧酸 分子式：C15H8O4 Hydroxyproline (Hyp) test kit
Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt 中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽 分子式：C14H6Na2O8S2 羥脯酸（Hyp）測(cè)試盒 Glamine syhetase (GS) test kit
Anthraquinone 中文名：蒽醌 分子式：C14H8O2 總堿度測(cè)定試劑盒 Total alkalinity determination kit
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid 中文名：氨噻肟酸 分子式：C6H7N3O3S 度：98.0%
兔子孕激素elisa試劑盒 兔子孕激素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子孕激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Adipic dihydrazide 1071-93-8 中文名：己二酸二 分子式：C6H14N4O2 度：99.0% 關(guān)鍵詞：
兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名： 分子式：C8H16O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adrenosterone 中文名：腎上腺甾酮 分子式：C19H24O3
兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 1207441-49-3 中文名： 分子式：C29H46O3
剛地弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸伐昔洛韋水合物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Valacyclovir hydrochloride hydrate
A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株17-酮基維庫(kù)溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口17-Keto Vecuronium Bromide
NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3-去乙酰基維庫(kù)溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3-Desacetyl Vecuronium
大鼠腦平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL玉米素核苷同分質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Zeatin riboside mixed Isomers
B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Doxapram hydrochloride
人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-2液體生物防腐劑，英文名或英文縮寫：Proclin 300，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：25克
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸，英文名或英文縮寫：Sulfamic acid，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：500克
CW-2細(xì)胞，人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,A875細(xì)胞 人急性早幼粒細(xì)胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑蛋白組學(xué)級(jí)25MG26305-03-3COLD
HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(果膠酶Y-23)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
