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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P63838 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63838 |
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1β(mouse MIP-1β) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D Dyphylline 中文名：二羥丙茶堿 分子式：C10H14N4O4
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 g (mouse MIP-1 g ) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D Dyphylline 中文名：二羥丙茶堿 分子式：C10H14N4O4 度：98.0%
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 a (mouse MIP-1 a /CCL3) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 原裝進(jìn)口 Dyphylline 479-18-5 中文名：二羥丙茶堿 分子式：C10H14N4O4
小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Clemastine fumarate 中文名：富馬酸氯馬斯汀 分子式：C25H30ClNO5 度：98.0%
小鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Duloxetine 中文名：鹽酸度洛西汀 分子式：C18H20ClNOS 度：98.0%
mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞 MouseN-芐氧羰基-L-蘇氨酸Z-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98
FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽N-Benzylglycine 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
癌細(xì)胞;MDA-MB-453N-芐基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韋Zanamivir Amine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CL-0431RT4(膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀羧酸代謝產(chǎn)物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
PANC-1(*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽，N6-苯甲酰-鈉鹽Adenosine 3′,5′-cyclic
Monophosphate, N6-Benzoyl-, Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸鹽，三鋰鹽P1,P5-Di(adenosine-5’-)pentaphosphate, Trilithium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5‘-O-(-2-硫代三1酸）三鋰鹽Adenosine 5′-O-(2-Thiodiphosphate), Trilithium Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
MCF-7 [MCF7], 癌細(xì)胞系2-甲基硫代二1酸腺苷2-Methylthio-ADP 3 salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Daturataturin A
133360-51-7 中文名： 分子式：C34H48O10 度：93.0% 關(guān)鍵詞： 曼陀羅屬; 曼陀羅; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Daturametelin I 904667-65-8 中文名： 分子式：C34H48O10 度：93.0% 關(guān)鍵詞： 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠趨化因子(mouse RAES) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
D-Aspartic acid 1783-96-6 中文名：D-天冬氨酸 分子式：C4H7NO4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Dasatinib 302962-49-8 中文名：達(dá)沙替尼 分子式：C22H26ClN7O2S 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
D-arabinitol 488-82-4 中文名： 分子式：C5H12O5 度：% 關(guān)鍵詞： 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
